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安捷伦色谱柱污染物主要来源于哪里?

浏览次数:1347发布日期:2022-05-17
  安捷伦色谱柱的使用者必须了解色谱柱固定相的表面特性以及分析物与固定相表面可能发生的相互作用。通常,样品基质总是包含一些分析人员不感兴趣的化合物,例如盐、脂类、脂肪化合物、疏水蛋白和其他生物化合物。它们可以被检测器观察到,其中显示了一些色谱峰、基线干扰,甚至一些倒峰。
  这些物质可能比要分析的物质具有更强或更弱的保留,保留较弱的化合物(例如盐)将在死体积中被洗脱。如果样品基质成分在色谱柱中有很强的保留,而流动相成分本身不​​足以将其洗脱下来,这些吸附或吸附的化合物会积累,通常在多次进样后堵塞柱头。当这些吸附样品的组成达到相对较高的浓度时,它们就会作为新的固定相出现。分析物可以与这些杂质相互作用并显示出新的分离机制。它可能会导致保留时间的变化和峰拖尾。如果色谱柱被严重污染,色谱柱的压力将达到无法承受的高度,使泵在超压下工作,导致柱头在堵塞位置塌陷。在另一种情况下,需要注意污染物并非来自样品或流动相,而可能来自仪器的密封圈碎屑。这些杂物会随流动相进入色谱柱,造成色谱柱堵塞。
  清洗被污染的安捷伦色谱柱的频率取决于有多少未知物质注入色谱柱,因为反相色谱柱有时可以在分离度损失和外来物质洗脱之前耐受大量污染物。用户经常等到观察到一些异常现象后才清洗色谱柱。但污染物的长期积累会使色谱柱的清洗变得更加困难。因此,如果色谱柱很容易被脏样品基质污染,建议定期清洁您的色谱柱。清洗次数越多,清洗条件越简单。
  防止污染物进入安捷伦色谱柱,可以考虑使用在线过滤器或更好的保护柱来保护分析柱。如果问题的根本原因是样品本身,可以考虑对样品进行过滤或使用固相萃取去除污染物。在线过滤器只能部分保护色谱柱,它们有助于从流动相中去除颗粒。颗粒来自您的样品或HPLC仪器的部件。在线过滤器不能保护色谱柱免受小于过滤器的物质的污染,可能会吸附在填料表面。
 
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