对于不同的分析样品和检测需求,安捷伦色谱柱应选择何种类型的流动相或载气?
浏览次数:175发布日期:2025-03-07
以下是安捷伦色谱柱在不同分析样品和检测需求下,流动相或载气的选择建议:
一、液相色谱仪流动相选择
1、反相色谱:
极性化合物分析:对于极性化合物,如酸性或碱性物质,通常选择在低pH值下进行分析,以抑制样品分子的电离,增加其在固定相上的保留。此时,可使用磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液等作为流动相的一部分,并调节至合适的pH值(如2-3)。常用的有机溶剂有甲醇、乙腈等,它们与水按一定比例混合构成流动相。例如,分析某些酸性药物成分时,可能采用0.1%磷酸溶液-乙腈(70:30,v/v)作为流动相。
非极性或弱极性化合物分析:对于这类化合物,一般选择在高pH值下操作,以减少硅羟基效应,提高分离效果。流动相可以是纯水或含有少量有机溶剂(如甲醇、乙腈等),并添加适当的缓冲盐以维持稳定的pH值。例如,分析一些疏水性的天然产物时,可能使用乙腈-水(90:10,v/v)作为流动相。
2、正相色谱:
主要用于分离中等极性和极性较大的化合物,如脂肪酸、脂溶性维生素、甾体激素等。常用的流动相是己烷或庚烷,加入一定比例的极性改性剂,如乙醇、异丙醇、四氢呋喃等,以调节流动相的极性和洗脱能力。例如,分析某些植物提取物中的脂溶性成分时,可能采用正己烷-异丙醇(95:5,v/v)作为流动相。
3、离子交换色谱:
根据样品中离子的性质选择相应的流动相。对于阳离子交换色谱,流动相通常是酸性水溶液;对于阴离子交换色谱,则使用碱性水溶液。为了改善分离效果和峰形,还可以在流动相中添加适量的有机溶剂。例如,分析蛋白质等生物大分子时,可能根据蛋白质的等电点选择合适的缓冲液作为流动相。
4、尺寸排阻色谱:
一般使用水或盐水系统作为流动相,有时也会添加少量的有机溶剂来改善分离效果。例如,分析多肽或蛋白质的分子量分布时,可能使用磷酸盐缓冲液-乙腈(60:40,v/v)作为流动相。

二、气相色谱仪载气选择
1、氢气:
优点:具有较低的分子质量和较小的分子尺寸,能够提供更高的分离效率和更快的分析速度。此外,氢气的热导率较高,适用于热导检测器(TCD),可获得较高的灵敏度。
适用场景:适用于对分离效率要求较高、需要快速分析的样品,如天然气分析、环境空气中的挥发性有机物分析等。但需要注意的是,氢气易燃易爆,使用时需特别注意安全。
2、氦气:
优点:化学性质稳定,不易与其他物质发生反应,因此特别适用于需要高灵敏度和稳定性的应用,如质谱检测器(MSD)。
适用场景:广泛应用于各种复杂样品的分析,如食品中农药残留的检测、药物代谢动力学研究等。虽然氦气的分离效率略低于氢气,但其安全性更高,且能保证电离室的高真空度。
3、氮气:
优点:耗费最少且来源稳定,成本相对较低。
适用场景:适用于对分离效率要求不是特别高的常规分析,如某些工业生产过程中的质量控制分析、环境监测中的部分项目分析等。但氮气的黏度较大,可能导致柱前压较高,因此在使用长色谱柱时需谨慎选择。
安捷伦色谱柱的流动相或载气选择需综合考虑分析样品的性质、检测需求以及实验条件等因素。正确的选择不仅能提高色谱分析的准确性和可靠性,还能延长色谱柱的使用寿命。